适用
Beacon黄曲霉毒素检测试剂盒利用竞争酶联免疫吸附原理定量检测小麦,大麦,芽麦,燕麦,谷物中的黄曲霉毒素。

检测原理
黄曲霉毒素检测试剂盒是基于竞争性酶联免疫吸附检测法。用甲醇/水震荡萃取粉碎样品中的黄曲霉毒素,过滤水相萃取物,然后进行免疫学检测。加黄曲霉毒素的酶标记物到已加有标准或样品的测试孔中,抗体被加入后反应开始,样品及酶标记物竞争结合连接在微孔上的抗体,10分钟培养后,倒掉孔中的溶液,洗掉微孔中未的结合黄曲霉毒素和酶标记物。加入无色的底物溶液,培养10分钟,所有结合的酶标记物使底物转化成蓝色物质。加入停止液然后读取吸光度值,未知浓度样品与标准吸光度值进行比较,就可以得到样品的黄曲霉毒素浓度。

特异性
黄曲霉毒素检测试剂盒对于黄曲霉毒素有很强的特异性,标准品设定为黄曲霉毒素B1,以下表格展示了与其他形式的交叉反应率。
复合物 50%BO 交叉反应率
黄曲霉毒素B2 39 25%
黄曲霉毒素G1 39.5 25%
黄曲霉毒素G2 221 4%
LOD (低检测限) 1.0ppb
LOQ (低定量限) 2.0ppb
试剂及材料
若试剂盒保存在2-8℃,未拆开包装的试剂盒在标识的保质期之前均可放心使用。

1. 真空包装,包含干燥剂的8×12的微孔板。
2. 5瓶2ml浓度为0,2.0,7.5, 25,100 ng/ml(ppb)的黄曲霉毒素标准品,(注意:因为谷物样品在萃取过程中1:10倍稀释,标准品实际上为设定标准浓度的1/10,所以原样品的浓度无需校正)。
3. 1瓶8ml的酶标记物。
4. 1瓶8ml的兔抗黄曲霉毒素抗体。
5. 1瓶14ml的底物溶液
6. 1瓶14ml的停止液(注意:1N 盐酸,小心操作!)
7. 操作说明书

注意事项
1. 每种试剂适用于Beacon 黄曲霉毒素试剂盒。其他生产商的试剂不可替代本试剂盒中的任何试剂,不同批次之间的试剂不可混用。
2. 被稀释或污染的试剂及程序中未提及的样品种类都会导致结果失真。
3. 不可使用过期试剂。
4. 开始实验前试剂需回温于室温(20-28℃),但避免试剂在室温存放过久(>24小时)。
5. 黄曲霉毒素为极毒物质,将所有丢弃的液体倒入盛有家用漂白粉(不低于10%)的塑料容器中,所有的实验器具必须在30%家用漂白粉溶液中浸泡至少1小时,戴上手套穿上防护服以避免皮肤及黏膜与试剂或样品萃取物接触,如果一旦接触,必须立即用大量水冲洗。
6. 停止液为1N 盐酸,避免皮肤及黏膜接触,如果有溅出,立即清除并用大量水冲洗。

所需材料(不提供)
1. 实验室用蒸馏水或去离子水
2. 色谱级甲醇
3. 具塞锥瓶,大于100ml
4. 用于萃取样品及收集萃取液玻璃器皿
5. 滤纸,Whatman GF/A及相当者
6. 可吸取50ul容量的移液器及性吸头
7. 可吸取50ul或100ul的八道移液器及性吸头
8. 吸水纸
10. 计时器